Využití nového in vitro modelu ke studiu vlivů vybraných environmentálních kontaminantů na retinoidní signálování

Logo poskytovatele

Varování

Publikace nespadá pod Ekonomicko-správní fakultu, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.
Autoři

BENÍŠEK Martin JANOŠEK Jaroslav NOVÁK Jiří HILSCHEROVÁ Klára

Rok publikování 2006
Druh Článek ve sborníku
Konference Študentská vedecká konferencia, 1.zväzok, biologická a environmentálna sekcia
Fakulta / Pracoviště MU

Přírodovědecká fakulta

Citace
Obor Vliv životního prostředí na zdraví
Klíčová slova retinoid signaling;N-PAHs; phthalates
Popis Řada látek znečišťujících životní prostředí vykazuje vzhledem k nízkým environmentálním koncentracím především chronické účinky. K těm patří především karcinogenita, imunotoxicita nebo endokrinní disrupce ale také embryotoxicita a teratogenita. Velmi významnou roli v procesech embryotoxicity a teratogenity hrají především retinoidní receptory (RAR, RXR), jejichž přirozenými ligandy jsou retinoidy. [4] Retinoidy jsou deriváty vitaminu A, které mají důležitou roli při vývoji různých tkání obratlovců a to díky vlivu na buněčnou proliferaci, diferenciaci a apoptózu[7]. Patří mezi ně například retinol, kyselina retinová (ATRA) a dále estery kyseliny retinové. Jako odpověď na navázání retinoidů podstoupí RAR/RXR receptory (vyskytující se v buňce převážně ve formě dimerů) konformační změny [1]. Následná iniciace transkripce specifických cílových genů má za následek nejrůznější účinky na úrovni molekulární, buněčné i organismální[3, 5]. O možném narušení těchto drah xenobiotiky je dosud známo jen velmi málo a existuje také pouze omezený počet in vitro metod, které by dovolovaly studovat tyto mechanismy. Na našem pracovišti jsme vyvinuli zcela novou jednoduchou metodu, umožnující screening anti/retinoidních efektů širokého spektra látek. V této metodě jsme použili buněčnou linii P19/A15, transfekovanou genem exprimujícím luciferázu. Tato exprese je řízena responsivními elementy kyseliny retinové. Tato linie je odvozená z linie P19, která se často používá pro in vitro experimenty v embryologii [7]. Po vazbě ligandu na receptor a následné aktivaci transkripce dochází k expresi luciferázy. Po reakci luciferázy se substrátem dochází k luminiscenci, která je stanovena na luminometru. V naší práci jsme prostudovali pomocí této nové metody vliv vybraných environmentálních kontaminantů, jako jsou některé ftaláty, dusíkaté heterocyklické aromatické uhlovodíky (N-PAH) a polycyklické aromatické uhlovodíky (PAH).Tyto látky byly vybrány zvláště pro jejich široké rozšíření v životním prostředí a malé znalosti o jejich vlivu na retinoidní signálování. Kromě výše zmíněné metody s buněčnou linií P19/A15 u buněk nediferencovaných jsme u některých látek provedli luminiscenční test na buňkách diferencovaných v buňky primitivního endodermu.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.