Využití nového in vitro modelu ke studiu vlivů vybraných environmentálních kontaminantů na retinoidní signálování
| Title in English | New in vitro model as a tool for studying interference of selected environmental contaminants with the signaling of retinoids |
|---|---|
| Authors | |
| Year of publication | 2006 |
| Type | Article in Proceedings |
| Conference | Študentská vedecká konferencia, 1.zväzok, biologická a environmentálna sekcia |
| MU Faculty or unit | |
| Citation | |
| Field | Environment influence on health |
| Keywords | retinoid signaling;N-PAHs; phthalates |
| Description | Řada látek znečišťujících životní prostředí vykazuje vzhledem k nízkým environmentálním koncentracím především chronické účinky. K těm patří především karcinogenita, imunotoxicita nebo endokrinní disrupce ale také embryotoxicita a teratogenita. Velmi významnou roli v procesech embryotoxicity a teratogenity hrají především retinoidní receptory (RAR, RXR), jejichž přirozenými ligandy jsou retinoidy. [4] Retinoidy jsou deriváty vitaminu A, které mají důležitou roli při vývoji různých tkání obratlovců a to díky vlivu na buněčnou proliferaci, diferenciaci a apoptózu[7]. Patří mezi ně například retinol, kyselina retinová (ATRA) a dále estery kyseliny retinové. Jako odpověď na navázání retinoidů podstoupí RAR/RXR receptory (vyskytující se v buňce převážně ve formě dimerů) konformační změny [1]. Následná iniciace transkripce specifických cílových genů má za následek nejrůznější účinky na úrovni molekulární, buněčné i organismální[3, 5]. O možném narušení těchto drah xenobiotiky je dosud známo jen velmi málo a existuje také pouze omezený počet in vitro metod, které by dovolovaly studovat tyto mechanismy. Na našem pracovišti jsme vyvinuli zcela novou jednoduchou metodu, umožnující screening anti/retinoidních efektů širokého spektra látek. V této metodě jsme použili buněčnou linii P19/A15, transfekovanou genem exprimujícím luciferázu. Tato exprese je řízena responsivními elementy kyseliny retinové. Tato linie je odvozená z linie P19, která se často používá pro in vitro experimenty v embryologii [7]. Po vazbě ligandu na receptor a následné aktivaci transkripce dochází k expresi luciferázy. Po reakci luciferázy se substrátem dochází k luminiscenci, která je stanovena na luminometru. V naší práci jsme prostudovali pomocí této nové metody vliv vybraných environmentálních kontaminantů, jako jsou některé ftaláty, dusíkaté heterocyklické aromatické uhlovodíky (N-PAH) a polycyklické aromatické uhlovodíky (PAH).Tyto látky byly vybrány zvláště pro jejich široké rozšíření v životním prostředí a malé znalosti o jejich vlivu na retinoidní signálování. Kromě výše zmíněné metody s buněčnou linií P19/A15 u buněk nediferencovaných jsme u některých látek provedli luminiscenční test na buňkách diferencovaných v buňky primitivního endodermu. |
| Related projects: |