CE-LIF of Green Fluorescent Fusion Proteins for Investigation of Phosphorylation

Varování

Publikace nespadá pod Ekonomicko-správní fakultu, ale pod Středoevropský technologický institut. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.

Název česky	Výzkum fosforylace GFP fúzních proteinů pomocí techniky CE-LIF
Autoři	MICHALCOVÁ Lenka DOPITOVÁ Radka HEJÁTKO Jan RYVOLOVÁ Markéta VÁLKOVÁ Martina PREISLER Jan
Rok publikování	2011
Druh	Konferenční abstrakty
Fakulta / Pracoviště MU	Středoevropský technologický institut
Citace
Přiložené soubory	Michalcova_CE-CE_2011.pdf
Popis	Ke studiu protein AHP5 fúzovaného s GFP byla použita metoda CE-LIF s budícím zdrojem laserovou diodou 405 nm. Fúzní protein AHP5-GFP byl exprimován v E.Coli a byl použit k optimalizaci metody, prototože přirozený výskyt tohoto protein je v rostlinách ve velmi nízkých koncetracích. AHP5-GFP je nestabilní a dochází k uvolňování GFP, tato skutečnost není ovlivněna teplotou skladováním (-20 a -80 C) ani přídavkem inhibitorů (EDTA, PMFS). Výsledky byly potvrzeny pomocí western blottingu. Fosforylace vzorku AHP5-GFP in vitro je nadále zkoumána. Pro lepší interpretaci elektroforegramů byl vzorek podroben gelové filtraci, kde byly získány hmotnostní frakce Ty byly zkoumány metodou CE-LIF a western blottingem
Související projekty:	Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací Multidetekční platforma pro mikrokolonové separace proteinů a peptidů CEITEC - středoevropský technologický institut