Využití bioluminiscenční bakterie Escherichia coli pro stanovení aktivity komplementového systému kaprovitých ryb

Logo poskytovatele

Varování

Publikace nespadá pod Ekonomicko-správní fakultu, ale pod Přírodovědeckou fakultu. Oficiální stránka publikace je na webu muni.cz.
Autoři

TOLAROVÁ Soňa VETEŠNÍKOVÁ ŠIMKOVÁ Andrea HYRŠL Pavel

Rok publikování 2008
Druh Konferenční abstrakty
Fakulta / Pracoviště MU

Přírodovědecká fakulta

Citace
Popis Komplementový systém je humorální faktor vrozené imunitní odpovědi ryb. Společně s fagocytózou a systémovým zánětem tvoří hlavní část nespecifické imunity. Komplementový systém je tvořen souborem více než 30 proteinů a u ryb byly popsány tři cesty jeho aktivace: klasická, alternativní a lektinová. Celková bakteriolytická aktivita (total activity TA) zahrnující všechny tři cesty a aktivita alternativní cesty (alternative pathway AP) byly stanoveny v séru a plasmě kapra obecného, Cyprinus carpio, jelce tlouště, Leuciscus cephalus a parmy obecné, Barbus barbus, všechny druhy náleží do čeledi kaprovitých ryb. Luminometrická metoda popsaná již u lososovitých ryb je založena na detekci produkce světela rekombinantním kmenem E. coli. Tato gram-negativní bakterie je citlivá k lýze způsobené komplementem, existuje tedy korelace mezi viabilitou bakterií a produkcí světla. Kontinuální měření bakteriální bioluminiscence probíhalo 3 hodiny v laboratorní teplotě. Jako měřený parametr byl použit čas potřebný pro usmrcení 50% bakterií. Bakteriolytická aktivita byla detekovatelná jak u TA, tak u AP. Spolehlivější výsledky však byly získány u TA, protože 50% pokles viability u AP nebyl vždy detekovatelný. Za účelem optimalizace metody byly testovány různé koncentrace vzorku každého druhu (TA: 0 , 350 mikrolitr/ml; AP: 0 , 400 mikrolitr/ml) a vybrané koncentrace byly použity pro následující analýzy. Vzorek plasmy parmy obecné, Barbus barbus o koncentraci 100 mikrolitr/ml potřeboval 1,48 hodin pro usmrcení 50% bakterií a vzorek jelce tlouště, Leuciscus cephalus o stejné koncentraci 1,97 hodin. K dosažení podobných hodnot u kapra obecného, Cyprinus carpio byla zapotřebí vyšší koncentrace plasmy, a to 300 mikrolitr/ml.
Související projekty:

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.