Klonování genů fágových lytických enzymů a jejich funkčních domén
Authors | |
---|---|
Year of publication | 2011 |
Type | Conference abstract |
MU Faculty or unit | |
Citation | |
Description | Vhodnou alternativou léčby bakteriálních infekcí je aplikace fágové terapie. Současným trendem fágové terapie je využití fágem kódovaných proteinů. V této studii jsme se zaměřili na přípravu lytických enzymů z fágů Staphylococcus aureus, který je původcem mnoha závažných onemocnění u člověka i u zvířat. Při svém životním cyklu musí fág dvakrát překonat buněčnou stěnu bakterií, při infekci buňky, kde se uplatňuje enzym bičíková hydroláza a na konci lytického cyklu, kdy buněčnou stěnu bakterie degraduje endolyzin. Gen pro endolyzin fága 812 a jeho mutanty s širším rozmezím hostitele byl klonován do dvou typů vektorů pSP72 a pET28. Endolyzin byl detekován pomocí zymogramu a western blottu. Aktivita lytických enzymů byla testována na souboru kmenů S. aureus, které nebyly citlivé k fágu 812, nebo byly rezistentní k antibiotikům. Enzymy byly účinné proti širšímu spektru bakteriálních kmenů než samotný fág. |
Related projects: |