Electrochemical determination of glutathion-S-transferase as a marker of proximal tubuls damage

Warning

This publication doesn't include Faculty of Economics and Administration. It includes Faculty of Science. Official publication website can be found on muni.cz.
Authors

VRTÍLEK Jiří KIZEK René VACEK Jan TRNKOVÁ Libuše

Year of publication 2003
Type Article in Proceedings
Conference Sborník příspěvků, VII.pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů
MU Faculty or unit

Faculty of Science

Citation
Field Electrochemistry
Keywords Electrochemistry and HPLC of glutathion-S-transferase;catalytic hydrogen evolution;Brdicka reaction
Description Poruchy metabolismu a výživy, představující jeden z klíčových problémů současné medicíny, způsobují celou řadu civilizačních onemocnění, mezi něž patří i poškození ledvin. V nedávné době bylo ukázáno, že pro přímou detekci poškození proximálních ledvinových tubulů by mohla být vhodným markerem glutathion-S-transferasa. Glutathion-S-transferasa (EC 2.5.1.18 - GST) patří do velké rodiny enzymů, které katalyzují připojení tripeptidu glutathionu (g-glutamylcysteinyl-glycin) k endogenním nebo exogenním substrátům. Glutathion připojený k hydrofobním a elektrofilním sloučeninám vytváří adukty s vyšší rozpustností ve vodě, které mohou být enzymaticky degradovány na soli merkapturových kyselin a vylučovány z organismu močí. Z hlediska renálního poškození je třeba ze čtyř tříd GST (a-GST, m-GST, p-GST a t-GST) sledovat hladinu a-GST, jejíž vzestup indikuje toto poškození. To znamená, že stanovení koncentrace a-GST v moči je senzitivní metoda pro diagnostiku renálního poškození. Bylo zjištěno, že chromatografické stanovení GST v moči není ovlivněno lékem ani změnou pH, což je pozitivním faktem pro sledování renálních funkcí u chronického ledvinového onemocnění nebo reakce ledvin po jejich transplantaci. Vedle stanovení koncentrace GST v moči pomocí HPLC byla vyzkoušena elektrochemická metoda - diferenční pulsní voltametrie doplněná technikou adsorptivního přenosu (AdT DPV). Při této technice byla GST adsorbována na různých pracovních elektrodách z malého množství pufrovaného roztoku. Registrované elektrochemické GST odezvy byly na různých pracovních elektrodách porovnávány. Bylo zjištěno, že uhlíkové elektrody poskytují velmi dobře reprodukovatelné oxidační signály tryptofanu (Trp) a tyrosinu (Tyr). Na rtuťové elektrodě (HMDE) byly pozorovány dva typy katalytických signálů GST, jednak pík H a pík odpovídající Brdičkově reakci. Na uhlíkové elektrodě byla studována závislost výšky oxidačních signálů na době akumulace a na koncentraci GST. Dá se předpokládat, že elektrochemické metody se mohou stát velmi užitečným prostředkem pro přímé stanovení GST v biologickém materiálu.
Related projects:

You are running an old browser version. We recommend updating your browser to its latest version.