Vliv hypoglykemie na vybrané geny, jejichž expresi zvyšuje hyperglykemie

Title in English The effect of hypoglycaemia on expression of genes upregulated by hyperglycaemia
Authors

PÁCAL Lukáš KURICOVÁ Katarína KAŇKOVÁ Kateřina

Year of publication 2014
Type Conference abstract
Citation
Description Úvod: Nadměrná produkce reaktivních metabolitů kyslíku v mitochondriích způsobená hyperglykemií a následná aktivace několika škodlivých drah má klíčový význam při vzniku a progresi mikrovaskulárních komplikací diabetu. Vliv hypoglykemie, důležitého buněčného stresoru a události často se vyskytující u diabetiků 1. typu a také součásti zvýšené glykemické variability, na dráhy aktivované hyperglykemií je málo prozkoumán. Proto jsme sledovali expresi genů kódujících proteiny/enzymy, které se uplatňují v patogenezi hyperglykemií indukovaného poškození, v podmínkách hypoglykemie in vitro. Konkrétně jsme srovnávali genovou expresi superoxid dismutázy (SOD2), hemoxygenázy (HMOX), podjednotky p65 transkripčního faktoru NF-?B, glyoxalázy 1 (GLO1), receptoru pro pozdní produkty glykace (RAGE) a DJ-1 (enzym s glyoxalázovou aktivitou) mezi buňkami kultivovanými v médiu s různými koncentracemi glukózy. Metodika: Primární lidské endoteliální buňky (HUVEC) a lidské embryonální ledvinné buňky (HEK293) byly po 48 hodinách růstu v příslušném médiu kultivovány 24 hodin v médiu s různým obsahem glukózy: (i) normoglykemie (5 mmol/l), (ii) hyperglykemie (25.5 mmol/l) and (iii) hypoglykemie (2.75 mmol/l). Z buněk byla izolována celková RNA a přepsána pomocí komečních kitů (Roche). Genová exprese byla stanovena pomocí TaqMan sond (Life Technologies). Jako referenční byl použit gen pro 18-S RNA. Výsledky: V souladu s naším předpokladem byla mRNA exprese všech studovaných genů zvýšená v podmínkách hyperglykemie ve srovnání s normoglykemií, statisticky významně pouze v případě GLO1 a p65 (zvýšení o 60 resp. 50%, obě P<0.05). Podobný trend byl pozorován za podmínek hypoglykemie ve srovnání s normoglykemií (nárůst o 25 – 35%, všechna P>0.05) s výjimkou HMOX, jejíž exprese byla mírně (o cca 10 %), ale statisticky nevýznamně snížená. Závěr: Naše pilotní výsledky naznačují, že hypoglykemie může mít na lidské primární endoteliální buňky a embryonální ledvinné buňky podobný vliv jako hyperglykemie a může tak představovat aditivní patogenetický faktor za podmínek vysoké glykemické variability.
Related projects:

You are running an old browser version. We recommend updating your browser to its latest version.